液相色譜流動(dòng)相脫氣：為何必不可少？廣州中森檢測(cè)案例解析

在高效液相色譜（HPLC）分析中，看似簡(jiǎn)單的流動(dòng)相脫氣步驟，實(shí)則是保障數(shù)據(jù)精準(zhǔn)可靠的關(guān)鍵防線。流動(dòng)相中溶解的氣體（主要是空氣里的氧氣和氮?dú)猓?，在高壓泵送和色譜柱溫控過程中極易析出形成微小氣泡，引發(fā)一系列嚴(yán)重干擾：

* 泵系統(tǒng)紊亂： 氣泡進(jìn)入高壓泵，導(dǎo)致壓力劇烈波動(dòng)甚至泵頭空轉(zhuǎn)，損傷儀器。

* 基線“噪音”與漂移： 氣泡流經(jīng)檢測(cè)器（尤其是紫外、熒光檢測(cè)器）時(shí)，造成基線劇烈跳動(dòng)、漂移，嚴(yán)重干擾目標(biāo)峰識(shí)別與積分。

* 峰形畸變與保留時(shí)間偏移： 氣泡占據(jù)色譜柱填料孔隙或管路空間，改變樣品分子正常路徑，導(dǎo)致峰展寬、分叉、拖尾，保留時(shí)間不穩(wěn)定，定量定性結(jié)果失真。

* 檢測(cè)靈敏度下降： 溶解氧可能引起某些敏感樣品（如含易氧化基團(tuán)化合物、熒光物質(zhì)）發(fā)生降解或熒光淬滅，降低檢測(cè)信號(hào)。

常用脫氣方法：

* 氦氣鼓泡脫氣： 向流動(dòng)相中持續(xù)通入氦氣（溶解度低），驅(qū)趕溶解氣體，效果佳但氦氣成本高。

* 在線真空脫氣機(jī)： 現(xiàn)代HPLC標(biāo)配，利用特殊膜管在真空環(huán)境下高效在線脫氣，方便高效。

* 超聲脫氣： 實(shí)驗(yàn)室常用輔助手段，將流動(dòng)相置于超聲波清洗器中震蕩促使氣體逸出，簡(jiǎn)便但效果相對(duì)有限，常作為預(yù)處理或與其他方法聯(lián)用。

* 真空抽濾脫氣： 在溶劑過濾的同時(shí)進(jìn)行真空脫氣，一舉兩得。

廣州中森檢測(cè)：氣泡干擾實(shí)戰(zhàn)排除

廣州中森檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室在分析某復(fù)雜樣品時(shí)，發(fā)現(xiàn)基線持續(xù)異常波動(dòng)，保留時(shí)間漂移，峰形異常。工程師系統(tǒng)排查后，鎖定問題根源：甲醇-水混合流動(dòng)相未經(jīng)充分脫氣，溶解氣體在系統(tǒng)內(nèi)析出形成微小氣泡。 這些氣泡干擾了泵的穩(wěn)定輸送，并在流經(jīng)檢測(cè)池時(shí)引起光路異常波動(dòng)。解決方案清晰明確：立即對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行嚴(yán)格在線脫氣（并輔以超聲預(yù)處理）。實(shí)施后，基線迅速恢復(fù)平穩(wěn)，峰形尖銳對(duì)稱，保留時(shí)間穩(wěn)定，數(shù)據(jù)可靠性得到根本保障。

結(jié)論： 流動(dòng)相脫氣絕非可有可無(wú)的步驟。它是消除氣泡干擾、確保液相色譜系統(tǒng)壓力穩(wěn)定、基線平穩(wěn)、峰形良好、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確重復(fù)的基石。無(wú)論是采用高效的在線脫氣機(jī)，還是結(jié)合超聲、真空抽濾等輔助手段，徹底脫氣都是獲取可信賴分析結(jié)果的必經(jīng)之路。廣州中森檢測(cè)的案例再次印證：忽視這一關(guān)鍵環(huán)節(jié)，再精密的儀器也可能產(chǎn)出失真的數(shù)據(jù)。