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武漢貝科新肽科技有限公司

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1. 葉綠體

葉綠體是植物細(xì)胞中重要的細(xì)胞器之一,它們負(fù)責(zé)進(jìn)行光合作用,將光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能。為了定位葉綠體,我們可以使用一種名為熒光素的化合物來(lái)標(biāo)記它們。熒光素可以被葉綠體中的葉綠素吸收,從而發(fā)出綠色熒光。在洋蔥細(xì)胞中,葉綠體通常位于細(xì)胞的邊緣或周?chē)?/p>

2. 線粒體

線粒體是細(xì)胞中的另一個(gè)重要細(xì)胞器,亞細(xì)胞定位,它們負(fù)責(zé)產(chǎn)生細(xì)胞所需的能量。為了定位線粒體,我們可以使用一種名為MitoTracker的化合物來(lái)標(biāo)記它們。MitoTracker可以穿過(guò)細(xì)胞膜并進(jìn)入線粒體,從而發(fā)出紅色熒光。在洋蔥細(xì)胞中,線粒體通常位于細(xì)胞的中央或周?chē)?/p>

用水稻原生質(zhì)體進(jìn)行亞細(xì)胞定位時(shí),為什么不拍攝葉綠體的自發(fā)熒光?

經(jīng)測(cè)驗(yàn),使用水稻黃化苗制備原生質(zhì)體,載體轉(zhuǎn)化效率及基因表達(dá)強(qiáng)度較高,而黃化苗中葉綠體較少,因此水稻原生質(zhì)體定位拍照時(shí),亞細(xì)胞定位公司,除非與葉綠體共定位,否則不拍攝葉綠體的自發(fā)熒光。

為什么要提供GFP空載的對(duì)照?qǐng)D片?

(1)作為整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的操作參照,可排除因?qū)嶒?yàn)操作而導(dǎo)致目的基因沒(méi)有熒光信號(hào)的影響。

(2)作為載體體系的參照,確認(rèn)構(gòu)建載體時(shí)所使用的載體是可正常表達(dá)熒光蛋白的。

細(xì)胞膜及內(nèi)膜系統(tǒng)相關(guān)的協(xié)同作用

黏著斑激酶(FAK)定位于細(xì)胞質(zhì)黏著斑、細(xì)胞核和內(nèi)體中。在細(xì)胞質(zhì)黏著斑中,F(xiàn)AK 通過(guò)調(diào)控細(xì)胞黏著斑的解聚與組裝及多個(gè)蛋白質(zhì)的磷酸化從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和遷移。在內(nèi)體中,F(xiàn)AK 通過(guò) FERM 結(jié)構(gòu)域定位到內(nèi)體并被。內(nèi)體中整合素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)間比質(zhì)膜上持續(xù)的時(shí)間更長(zhǎng),并且能夠阻止腫1瘤細(xì)胞發(fā)生失巢凋亡,因此,內(nèi)體 FAK 可通過(guò)抵抗失巢凋亡促進(jìn)腫1瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。而在細(xì)胞核中,F(xiàn)AK 可導(dǎo)致 p53 的多聚泛素化及降解,洋蔥亞細(xì)胞定位公司,從而影響正常細(xì)胞的存活和腫1瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外,植物亞細(xì)胞定位,核 FAK 還能夠通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞的因子和趨化因子的表達(dá)促進(jìn)腫1瘤免疫逃逸的發(fā)生。這表明 FAK 在不同亞細(xì)胞定位下,與不同的蛋白質(zhì)協(xié)同作用,共同調(diào)控腫1瘤的發(fā)生和發(fā)展。

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