原位末端凋亡檢測(cè)（Tunel）

實(shí)驗(yàn)原理： TUNEL技術(shù)可對(duì)組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個(gè)凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色，能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點(diǎn)，利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如，生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端，再用組化法或熒光檢測(cè)凋亡細(xì)胞。

結(jié)1核病是嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的傳1染性疾病，每年約有200萬(wàn)人死于該病，其死1亡率在傳1染性疾病中僅低于艾1滋病，隨著醫(yī)1療診斷技術(shù)的迅猛發(fā)展，結(jié)1核病病理診斷經(jīng)歷了單一形態(tài)學(xué)和聯(lián)合特殊染色，到如今利用分子病理基因檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的三個(gè)階段。

我科早在全1國(guó)建立了系統(tǒng)性結(jié)1核病分子病理診斷技術(shù)的平臺(tái)，率1先將分子病理診斷技術(shù)在結(jié)1核病中應(yīng)用并推廣，解決了傳統(tǒng)病理對(duì)菌陰肺結(jié)1核及肺外結(jié)1核病的診斷率低、結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病無(wú)法鑒別以及耐藥結(jié)1核病無(wú)法診斷等難題。同時(shí)，我科作為中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)1核病學(xué)分會(huì)金1牌病理培訓(xùn)基地，負(fù)責(zé)組織制定了結(jié)1核病病理診斷規(guī)范、培訓(xùn)了大量的專(zhuān)1業(yè)技術(shù)人員，為形成結(jié)1核病病理學(xué)綜合診治新模式做出了卓1越貢獻(xiàn)!

tunel流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)服務(wù)通常稱為細(xì)胞程序性死1亡，是由基因控制的主動(dòng)性細(xì)胞死1亡過(guò)程。越來(lái)越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)，如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力，利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫1瘤診斷，療1效評(píng)價(jià)和預(yù)后預(yù)測(cè)提供了重要的參考指標(biāo)。

TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用來(lái)檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡早期過(guò)程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況，其原理是生物素biotinylate標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端，并與連接辣根過(guò)氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的鏈霉親和素streptavidin特異性結(jié)合，后者又與POD底物H2O2、二氨1基聯(lián)1苯1胺（DAB）產(chǎn)生深棕色反應(yīng)，特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，染色體原位雜交經(jīng)驗(yàn)的公司，因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞；由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA斷裂，因而沒(méi)有3‘-OH形成，很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細(xì)胞樣本（細(xì)胞涂片）在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測(cè)。還可應(yīng)用于抗腫1瘤藥的藥1效評(píng)價(jià)，以及通過(guò)雙色法確定細(xì)胞類(lèi)型和分化階段。