植物基因組原位雜交技術(shù)服務(wù)-科銳諾生物科技
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武漢科銳諾生物科技有限公司
- 主營業(yè)務(wù):外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
- 公司官網(wǎng):www.whkrn.com
- 公司地址:湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號武漢國英種子A棟1樓
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(王經(jīng)理 先生)
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滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA試劑,避光室溫反應(yīng)5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。
DAPI復(fù)染核:切片滴加DAPI染液,避光孵育8min,沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。
鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍(lán)光;FAM(488)綠光激發(fā)波長465-495nm,發(fā)射波長515-555 nm,發(fā)綠光;CY3紅光激發(fā)波長510-560,發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光。)

.雜交?。?) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應(yīng)緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強(qiáng)度和清晰度。(4) 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時(shí)用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時(shí)用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時(shí)。(5) 將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,植物基因組原位雜交技術(shù)服務(wù),盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán),以防液體蒸發(fā)。

基因芯片又稱DNA芯片或DNA微陣列。其原理是在固體載體(硅片、玻片、硝1酸纖維素膜)上按照特定的排列方式集成大量已知DNA/cDNA片段,形成DNA/cDNA微矩陣。 基因芯片技術(shù)是一門新興的技術(shù),由于該技術(shù)能在一次實(shí)驗(yàn)中自動、快速、敏感地同時(shí)檢測數(shù)千條序列,而且獲得的序列信息高度特異、穩(wěn)定。根據(jù)探針類型分為DNA芯片和cDNA芯片,前者用于檢測基因突變,實(shí)現(xiàn)腫1瘤早期診斷、判斷預(yù)后及治1療;后者用于檢測基因表達(dá),對腫1瘤進(jìn)行發(fā)現(xiàn)性分類和預(yù)測性分類。

植物基因組原位雜交技術(shù)服務(wù)-科銳諾生物科技由武漢科銳諾生物科技有限公司提供?!巴饷隗w,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”選擇武漢科銳諾生物科技有限公司,公司位于:湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號武漢國英種子A棟1樓,多年來,科銳諾堅(jiān)持為客戶提供好的服務(wù),聯(lián)系人:王經(jīng)理。歡迎廣大新老客戶來電,來函,親臨指導(dǎo),洽談業(yè)務(wù)??其J諾期待成為您的長期合作伙伴!
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