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原理
原位雜交技術(shù)是在一定的溫度和離子濃度下，使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補(bǔ)規(guī)則與組織細(xì)胞內(nèi)待測的核酸復(fù)性結(jié)合而使得組織細(xì)胞中的特異性核酸得到定位，并通過探針上所標(biāo)記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。
經(jīng)特定標(biāo)記的核苷酸鏈為探針，可與組織切片、細(xì)胞或染色體標(biāo)本中的待檢DNA片段或mRNA進(jìn)行雜交，然后顯示標(biāo)記物，從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項(xiàng)技術(shù)可研究各種基因在染色體上的定位，編碼某種蛋白質(zhì)的mRNA在胞質(zhì)中的表達(dá)。
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對特定核酸順序進(jìn)行精1確定量定位的過程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
原位雜交的特點(diǎn)是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標(biāo)本上進(jìn)行。所謂原位即指標(biāo)本上DNA原位變性，在利用放1射性或非放1射性標(biāo)記的已知核酸探針雜交后，通過放1射自顯影或非放1射性檢測體系來檢測染色體上特異DNA或RNA順序，分子病理技術(shù)服務(wù)，可用放1射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現(xiàn)的頻率或熒光的強(qiáng)弱來確定探針的位置，從而進(jìn)行準(zhǔn)確的基因定位。
原位雜交是在分子生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，是在研究生物體發(fā)育過程中的一種極為重要的分子遺傳學(xué)的研究方法。其英文名為insitu hybridization，其中in situ為拉丁文，字面的意思理解就是說在其原來的天然的位置處雜交。用已標(biāo)記的核酸探針與組織切片或細(xì)胞中的待測核酸中的互補(bǔ)序列雜交， 從而對組織細(xì)胞中的核酸進(jìn)行定性、定位和相對定量分析。是一種直接、簡便的研究基因定位和表達(dá)的方法?；驹?-堿基互補(bǔ)配對原理
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第4年
